La enfermedad de Chagas es causada por el parásito Trypanosoma cruzi. Entre los desafíos actuales para países no endémicos, está el conocer la prevalencia de la enfermedad en grupos de personas procedentes de áreas endémicas con prolongada permanencia. En este sentido nos popusimos determinar la seropositividad de enfermedad de Chagas en estudiantes bolivianos de la Escuela Latinoamericana de Medicina (ELAM). Se determinó la seropositividad de Tripanosomiasis americana en 80 estudiantes que arribaron a la ELAM durante el período entre septiembre a noviembre del 2012, utilizando cuatro métodos serológicos comerciales, y el empleo de la técnica de PCR-kDNA. La seropositividad resultó ser de 6,25 %, detectándose la presencia del parásito en los cinco estudiantes que resultaron seropositivo. La técnica de PCR-kDNA mostro una sensibilidad y especificidad diagnóstica de 100 %, lo que permite considerarla como una herramienta útil y prometedora para el diagnóstico de la enfermedad en pacientes en fase crónica. Al relacionar las características socio-demográficas y epidemiológicas con la presencia de infección por T. cruzi, aún cuando se encontró mayor seropositividad en el grupo de estudiantes del sexo femenino, que procedían de zonas rurales, con presencia del vector y de departamentos bolivianos endémicos, no se encontró asociación estadísticamente significativa, excepto la procedencia de una zona rural. En la evaluación preliminar de los métodos que forman parte del diagnóstico para la confirmación de la infección por T. cruzi, estos mostraron validez, seguridad diagnóstica y concordancia suficientes para justificar su uso en cada uno de los niveles del algoritmo.